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厭氧培養(yǎng)箱的操作

更新時間:2017-12-20點擊次數(shù):3083

厭氧培養(yǎng)箱的操作

一、 操作室厭氧環(huán)境形成

1.按使用要求放置好必要的配件和器具,,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋。

2.通電源開照明燈,,開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度,。

3.操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉),。

4.關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗,。

5.操作室內(nèi)*次置換(氮氣置換):

(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一頭插入塑料袋,。

(2)接通氮氣進氣路,,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,,然后扎緊袋口,。

(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,。

(4)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),至全部放出,。

6.操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一 次充氮過程,,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。

7.操作室第三次置換(混合氣體置換):

(混合氣體配比為:N2:H2:CO2=85%:10%:5%)

(1)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣,,充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣,。

(2)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥),,使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計,,流量為每分鐘10毫升左右。

(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi),。

(4)通過三次換氣后,,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

8.操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,,接通除氧催化器電源進行催化除氧,,一 小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其情況,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境,。

9.開紫外線滅菌燈,,室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間自定,。

 

二,、 菌種的置入和培養(yǎng)

1.檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊。

2.打開取樣室外門,,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門,。

3.取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米汞柱(66Kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復(fù)零位后進行下次操作。

4.如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù),。

5.取樣室內(nèi)外門開啟,,關(guān)緊要抽低真空度100毫米汞柱(13Kpa)檢驗及幫助操作。

6.厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:

(1)每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,,正常情況下使用,。如不正常就必須重新?lián)Q氣。

(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,,使補進的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,,保證了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣流量選定為每分鐘10毫升左右,。

(3)連續(xù)培養(yǎng)運行一 天,,更換一 次除氧劑和干燥劑。

7.接種棒滅菌器的應(yīng)用:

(1)隨時用鎳鉻電熱絲使電極短路而變赤熱以進行殺菌(接種棒)

(2)熔蠟處可直接放上,,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟,。

8.操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制,。

9.混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,,使輸出壓力為0.1Mpa左右,。

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